DMEM细胞培养基颜色变化常见问题
1.为什么这个DMEM培养基是鲜红色的
培养基的颜色主要是来自酚红由它来显示的，酚红指示颜色非常灵敏，p值范围为6-8，颜色由黄变为紫红。酚红不是必须的，在有些情况下甚至是多余的，酚红有类似固醇类激素的作用，如果涉及到固醇类激素相关的细胞培养，最好不要添加。但是为了培养方便，能让我们直观地感觉培养液的状况，加入酚红后，如果培养液偏酸了，就显示偏黄色，偏碱性了就显示偏紫色。一般来说，污染细菌或者长时间不换液时，培养基变成黄色，主要是因为细菌和细胞过度增长，产生了酸性物质。开封后的培养基保存在4℃冰箱中，培养基内的二氧化碳会逐渐溢出，pH偏碱性，所以培养基就偏紫色了。偏紫色的培养基，可以通入无菌过滤的二氧化碳，调整pH值后继续使用。长时间没用完的碱性培养基不建议继续使用，会造成细胞生长停滞或死亡。
实验室的细胞培养中，培养基的PH值对实验的效果有很大的影响。因为培养基的PH值可通过影响培养物的营养元素的吸收、呼吸代谢、多胺代谢和DNA合成、植物激素进出细胞等作用直接或间接地影响愈伤组织形成及其形态建成。当PH值大于65 时，高温高压灭菌时会发生颜色反应。当PH值68时，颜色有质的变化。一般情况下灭菌的时间和压力对培养基颜色没有影响。
2.为什么培养皿放在一个没有开启CO2的孵箱里面，培养液颜色偏紫色
一般的DMEM使用的缓冲体系是NaHCO3， 初中的时候应该见过如下的方程2NaHCO3=Na2CO3+CO2+H2O在没有CO2的孵箱中，培养液中的CO2一直溢出，碳酸变少了，溶液变碱性了，就偏紫色了。同时我们打开了很久的DMEM瓶里面的培养液也会慢慢偏紫色，也就是这个道理。
3.培养基偏紫色了还能用不
可以将该偏紫色的培养基置于CO2孵箱中，拧松瓶盖。一段时间之后你会发现颜色变为鲜红色了，那么可以继续接着用。但是不要使用过长时间未用完并且变色的培养液，置于空气下氧化之后培养基成分可能已发生了变化。
在细胞培养过程中，检查培养液颜色与透明度的变化，颜色变黄，说明PH值下降；变红或紫红色，说明PH值上升，细胞生长停滞、死亡，一般生长稳定的细胞2-3天换液一次，生长缓慢的细胞可3-4天换液一次。
