HCC1806-Luc人乳腺鳞状癌细胞-荧光素酶标记_人源细胞系_细胞系_澳睿赛生物技术（上海）有限公司

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HCC1806-Luc人乳腺鳞状癌细胞-荧光素酶标记

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商品货号: ORC1029LUC

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规格： 1×10⁶cell

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规格参数

- 产品名称：HCC1806-Luc人乳腺鳞状癌细胞-荧光素酶标记
- 产品品牌：澳睿赛生物
- 培养基：DMEM+10%FBS+PS
- 组织来源：胸部；乳腺
- 细胞形态：上皮细胞样；多角形
- 种属：人
- 生长特性：贴壁细胞
- 细胞类型：肿瘤细胞
- 商品货号：ORC1029LUC

HCC1806-Luc人乳腺鳞状癌细胞-荧光素酶标记

一、细胞基本属性
细胞名称	HCC1806-Luc人乳腺鳞状癌细胞-荧光素酶标记
细胞别称	HCC1806-Luc
商品货号	ORC1029LUC
种属来源	人
年龄性别	女性；60岁
组织来源	胸部；乳腺
生长特性	贴壁细胞
细胞形态	上皮细胞样；多角形
背景简介	The HCC1806 breast cancer cell line was initiated on July 31, 1995, and took 10 months to establish.
生物安全等级	BSL-1
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
基因表达情况	epithelial glycoprotein 2 (EGP2); cytokeratin 19
培养基	RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5%, 温度：37℃
冻存条件	冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮

细胞筛选：

该细胞为已经稳定转染LUC的细胞，随细胞传代次数的增加，其LUC荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。

细胞经过20μg/ml嘌呤霉素筛选，平时培养可维持10μg/ml嘌呤霉素

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL完全培养基，培养过夜）。第三天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min（视细胞消化情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，，用新鲜的完全培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代。

9. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

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