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AML-12-LUC 小鼠正常肝细胞(LUC标记)

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  • 商品货号: ORC0342LUC
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  • 规格: 1×10⁶cell
  • 上架时间: 2024-12-05
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  • AML-12-LUC 小鼠正常肝细胞(LUC标记)
    • 产品名称:AML-12-LUC 小鼠正常肝细胞(LUC标记)
    • 产品品牌:澳睿赛生物
    • 培养基:DMEM+10%FBS+PS
    • 组织来源:肝
    • 细胞形态:上皮细胞样
    • 种属:小鼠
    • 生长特性:贴壁细胞
    • 细胞类型:正常细胞
    • 商品货号:ORC0342LUC
AML-12-LUC 小鼠正常肝细胞LUC标记)
 
一、细胞基本属性
细胞名称
AML-12-LUC小鼠正常肝细胞LUC标记
细胞别称
AML-12-LUC
商品货号
ORC0342LUC
种属来源
小鼠
年龄性别
雄; 3月龄
组织来源
生长特性
贴壁生长
细胞形态
上皮细胞样
背景简介
AML12(小鼠肝12)细胞系是从小鼠(CD1株  MT42系)转人TGF - alpha基因的肝细 胞中构建的。
生物安全等级
1
细胞规格
1 × 106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测
基因表达情况
albumin; human transforming growth factor alpha (TGF alpha); mouse TGF alpha.
保藏机构
ATCC; CRL-2254 BCRC; 60326 BCRJ; 0354
培养基
D/F12+10%FBS+1%ITS+40ng/mL地塞米松+1%P/S
培养条件
气相 :95%空气+5%二氧化碳;温度: 37℃
冻存条件
无血清冻存液 ,液氮储存
倍增时间
~37小时
STR鉴定位点
 
 
细胞筛选:
该细胞为已经稳定转染LUC的细胞,随细胞传代次数的增加,其LUC荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。
细胞经过20μg/ml嘌呤霉素筛选,平时培养可维持10μg/ml嘌呤霉素
二、细胞培养操作
1)复苏细胞:  以下细胞培养冻存处理仅供参考 ,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻 ,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件 下离心3 min ,弃去上清液 ,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶    中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中 ,加入约4 mL完全培养 ,培养过夜) 。第三天换液并检查细  胞密度。
 
 
2)细胞传代:  如果细胞密度达 80%-90% ,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清 ,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液( 0.25%Trypsin-0.02%EDTA 于培养瓶中 ,使消化液浸润所有细胞 ,将培养瓶置于   37℃培养箱中消化1 -3min(视细胞消化情况而定 然后在显微镜下观察细胞消化情况 ,若细胞大部分 变圆并脱落 ,迅速拿回操作台 ,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离 心管中  1000 rpm离心5 min ,弃去上清液 ,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中 置于培养箱中培养。
 
 
3)细胞冻存: 待细胞生长状态良好时 ,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液 ,装入无菌离心管中  1000 rpm件下离心4 min ,弃去上清液 ,用PBS清洗 一遍 ,弃尽PBS ,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液 ,使细胞密度5 × 106 ~ 1 × 107/mL ,轻轻混匀 ,每支冻存管冻存 1mL细胞悬液 ,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱  24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
 三、培养注意事项
 
1 . 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好 ,培养液是否有漏液 、浑浊等现象 ,若有上述现象 发生请 及时和我们联系。
 
2 . 仔细阅读细胞说明书  了解细胞相关信息  如细胞形态  所用培养基  血清比例、 所需 细胞因     子等 ,确保细胞培养条件一致 ,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题 ,责任由 客户自行承担。
 
3 .  75%酒精擦拭细胞瓶表面  显微镜下观察细胞状态。 因运输问题  部分细胞由于温度 变化及 剧烈碰撞死亡破碎形成碎片 ,是正常现象。观察好细胞状态后  75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于
37℃培养箱放置 2-4h。
 
4. 贴壁细胞可以消化 ,悬浮细胞直接混匀收集细胞  900 rpm-1000 rpm 离心 3 min ,弃上 清。加
5 mL PBS 重悬细胞 ,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min  用新鲜的完全培养基重悬 细胞 ,并接种 到新的培养瓶或培养皿中 ,置于培养箱中进行培养。
 
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
 
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片 ,记录细胞状态 ,便于和我司技术部沟通 交流。  于运输的原因 ,个别敏感细胞会出现不稳定的情况 ,请及时和我们联系  告知细胞 的具体情况  
便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
 
7. 该细胞仅供科研使用。
 
8. 备注 :运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞 ,请换用按照说明书细胞培 养条件新配
制的完全培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1: 2 传代 
 
9. 注意:  1:2 传代就是 1  T25 瓶传 2  T25 瓶或者 2  6cm 皿。不是 1  T25  2  10cm 皿。
AML-12-LUC 小鼠正常肝细胞(LUC标记)
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