支原体高效清除剂_细胞污染清除剂_细胞辅助试剂_澳睿赛生物技术（上海）有限公司

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支原体高效清除剂

支原体可通过细胞之间交叉污染，操作人员的口腔、皮肤造成污染、血清等添加物而带入污染。
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商品货号: ORCPB0638B

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规格：

上架时间： 2024-08-15

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规格参数

- 产品名称：支原体高效清除剂
- 产品品牌：澳睿赛生物
- 有效期：2年
- 存储条件：-20℃避光
- 规格：1mL
- 商品货号：ORCPB0638B

支原体高效清除剂

Mycoplasma Efficient Removal Agent

产品信息：

产品名称	产品货号	规格	储存条件
支原体高效清除剂，2000 × Mycoplasma Efficient Removal Agent，2000 ×	ORCPB0638A	500μL	-20℃避光
	ORCPB0638B	1mL
	ORCPB0638C	2mL

产品描述：

支原体污染是细胞培养领域的世界性问题，世界各国的细胞支原体污染平均比例为30~60%。支原体直径约为 0.1~0.3μm，具有变形能力，可透过常见过滤膜（0.22~0.45μm），因此常规的无菌过滤方法不能将其去除，常用的抗生素也对支原体无效。

支原体可通过细胞之间交叉污染，操作人员的口腔、皮肤造成污染、血清等添加物而带入污染。由于支原体无法通过常规的光学显微镜观察到，不会引起培养基混浊，因此细胞被支原体污染一般难以察觉。

支原体会消耗必须氨基酸，影响细胞生长速率，造成代谢物累积，改变细胞形态，影响DNA、RNA、蛋白质的合成，抑制细胞因子表达，改变被污染细胞的基因表达谱，诱导染色体畸变。

支原体高效清除剂经过了上百种细胞的测试和长期的实验验证，能以较低的浓度杀灭支原体，不仅可用于细胞株/系，还可应用于敏感和较脆弱的细胞，如干细胞和原代细胞。本产品仅12小时就可以显著抑制支原体生长，1~2周左右即可清除支原体污染，且不影响细胞本身的代谢，完美兼具特异性和高效清除支原体的特点，且对细胞温和无损伤，最大程度上挽救您的珍贵细胞。

产品优势：

² 高效性，12h即可有效抑制支原体的增殖；

² 高特异性，特异性清除支原体；

² 无耐药性，活性成分为多肽类，不会产生耐药性；

² 高利用率，未被利用的成分可降解为氨基酸被细胞利用；

² 高安全性，对细胞几乎无毒性，已在上百种细胞上验证。

质量控制：

☆ 通过支原体、真菌、支原体、内毒素检测

☆ 通过渗透压、pH 检测

☆ 通过产品性能检测

运输及保存方法：冰袋运输，-20℃避光保存，保质期2年

使用方法：

从-20℃冰箱内取出支原体高效清除剂，将试剂管瞬时离心（3000rpm，3~5s）后放置于EP管架上，用75%的酒精喷洒试剂管的表面，在生物安全柜中进行无菌操作；

以T25细胞培养瓶为例：

清除支原体污染操作步骤

对于已检测或怀疑有支原体污染的细胞，在细胞培养基中加入适量支原体高效清除剂，通常推荐使用的稀释倍数为2000×，如：6 mL的细胞培养基加入3 μL的支原体高效清除剂混匀。连续加药培养1~2周即可有效清除支原体污染。

若支原体污染较严重，可酌情增加药物浓度以提高清除支原体的效率，推荐尝试最小稀释倍数、中间稀释倍数、最大稀释倍数三个浓度进行测试。以细胞系（成纤维样）为例，建议将细胞分为三份，分别采用500×、1000×、2000×三个浓度进行支原体清除。若500×对细胞生长无明显影响，可采用500× 浓度快速清除支原体，若500×对细胞生长有明显影响，则采用1000×浓度清除支原体，连续加药培养 1~2周（或传代3次）后，检测是否还存在支原体污染。如果还存在支原体污染，可继续培养1周。

注意：可参考下表选择稀释倍数，达到最佳清除效果。

细胞类型	细胞对药物敏感度	细胞举例	建议稀释倍数
细胞系（类成纤维样）	☆	293T、Raw264.7、HT22、3T3-L1	500×~2000×
细胞系（上皮样）	☆☆	MCF-7、Hep G2、Hela、HUVEC	1000×~2000×
原代细胞（成纤维样）	☆☆	成纤维细胞、间质细胞	1000×~2000×
原代细胞（上皮样）	☆☆☆	上皮细胞、内皮细胞、肿瘤细胞	1500×~2000×
干细胞（成纤维样）	☆☆☆	间充质干细胞	1500×~2000×
胚胎干细胞（克隆样）	☆☆☆☆	H1、H9、iPS	2500×~ 4000×

预防支原体污染操作步骤

若细胞需长时间培养，建议每2~3周进行定期预防。在细胞培养基中加入适量支原体高效清除剂，通常推荐使用的稀释倍数为3000×，如：6mL的细胞培养基加入2μL的支原体高效清除剂混匀。连续加药培养1~2周，即可有效防止支原体污染或抑制支原体增殖。

注意：可参考下表选择稀释倍数，有效预防支原体污染。

细胞类型	细胞对药物敏感度	细胞举例	建议稀释倍数
细胞系（类成纤维样）	☆	293T、Raw264.7、HT22、3T3-L1	3000×
细胞系（上皮样）	☆☆	MCF-7、Hep G2、Hela、HUVEC	3000×
原代细胞（成纤维样）	☆☆	成纤维细胞、间质细胞	3000×
原代细胞（上皮样）	☆☆☆	上皮细胞、内皮细胞、肿瘤细胞	3000×
干细胞（成纤维样）	☆☆☆	间充质干细胞	3000×
胚胎干细胞（克隆样）	☆☆☆☆	H1、H9、iPS	6000×

实验流程图：

温馨提示：

1. 使用本试剂前请仔细阅读说明书；

2. 本产品经0.1 μm 过滤除菌，使用本产品时无需过滤，可直接加入培养基使用；

3. 本试剂具有专利技术，-20℃保存时不冻结，使用时无需解冻，从-20℃取出即可使用；

4. 为了发挥最好的药效，含药培养基建议现配现用，如果加药培养基未用完，于4℃冰箱中避光保存，2周内用完，使用培养基前需预热至37℃；

5. 贴壁细胞换液或传代前，弃去旧的培养基，用含1000×支原体高效清除剂的PBS轻轻冲洗细胞表面2次。悬浮细胞、贴壁不牢的细胞、半贴半悬细胞换液或传代前，可利用支原体直径远小于细胞直径的特点，采用150 g（或900 rpm）低速离心5mins，弃去旧的培养基，再用含1000×支原体高效清除剂的PBS轻轻冲洗细胞2次；

6. 用含药PBS清洗细胞后，加入含有支原体高效清除试剂的新鲜完全培养基（传代后铺细胞需更换为新的瓶/板），1天换液1次，连续加药4~7天，或者2天换液1次，连续加药7~14天，若细胞污染非常严重时，需增加换液频率和延长处理时间；