VX2 兔间变表皮鳞癌瘤株_其他细胞系_细胞系_澳睿赛生物技术（上海）有限公司

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VX2 兔间变表皮鳞癌瘤株

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规格参数

- 产品名称：VX2 兔间变表皮鳞癌瘤株
- 产品品牌：澳培赛生物
- 种属：其他
- 生长特性：贴壁细胞
- 细胞类型：肿瘤细胞
- 商品货号：ORC1059

VX2 兔间变表皮鳞癌瘤株

一、细胞基本属性
细胞名称	VX2 兔间变表皮鳞癌瘤株
细胞别称	VX2
商品货号	ORC1059
种属来源	兔子
组织来源	皮肤
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮样
传代比例	1:3-1:5
换液频率	每2-3 天换液一次
传代周期	3-4天
细胞规格	1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
培养基	MEM，10%FBS；
培养条件	空气95%，二氧化碳5%；37℃培养
冻存条件	90%FBS，10%DMSO
用途	仅供科研使用

二、细胞培养操作

1)复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1mL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培养瓶中，于37°C培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

C、按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按1: 2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x 10^6~1x10^7/mL,轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

C、将冻存管放入-80°C冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项.

1.收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件-致, 若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题, 责任由客户自行承担

3.用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37°C培养箱放置2-4h。

4.贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min,弃上清。加5mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min, ，用新鲜的完全培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5.请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6.建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7.该细胞仅供科研使用。

8.备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1: 2传代。

9.注意:1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

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