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大鼠胰岛细胞

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  • 规格: 5×10^5cel
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  • 大鼠胰岛细胞
    • 产品名称:大鼠胰岛细胞
    • 产品品牌:澳睿赛生物
    • 组织来源:胰腺组织
    • 细胞形态:梭形、多角形
    • 种属来源:大鼠
    • 规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
    • 传代特性:可传1-2代
大鼠胰岛细胞
一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠胰岛细胞
组织来源
胰腺组织
商品货号
ORCR357
种属来源
大鼠
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
细胞简介
大鼠胰岛细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌生长抑素,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛细胞作为糖尿病新药的细胞筛选模型需保持其结构完整、生理功能稳定和足够长的存活时间。胰岛占胰腺总质量的1%-2%,每个胰岛大概含有1000个细胞。胰岛移植可消除常规治疗产生的严重低血糖症状,具有创伤小及并发症少等优点,是最有前景的Ⅰ型糖尿病治疗方案。移植胰岛的获得需经过供体筛选、胰腺消化、胰岛分离纯化及结果鉴定等步骤,分离纯化效果取决于原料及操作方法的选择。
培养基
含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
包被条件
 
换液频率
每2-3天换液一次
生长特性
贴壁
细胞形态
梭形、多角形
传代特性
可传1-2代
消化液
0.25%胰蛋白酶
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
 
方法简介:澳睿赛实验室分离的大鼠胰岛细胞采用胶原酶灌注消化法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:澳睿赛实验室分离的大鼠胰岛细胞经DTZ染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠胰岛细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
 
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠胰岛细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈棱形、多角形 ,在澳睿赛技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。   
      
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技
术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
 
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
大鼠胰岛细胞
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