LS 174T [LS174T]（人结肠腺癌细胞）_人源细胞系_细胞系_澳睿赛生物技术（上海）有限公司

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LS 174T [LS174T]（人结肠腺癌细胞）

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商品货号: ORC0122

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规格： 1×10⁶cell

上架时间： 2022-12-29

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规格参数

- 产品名称：LS 174T [LS174T]（人结肠腺癌细胞）
- 产品品牌：澳睿赛生物
- 生长特性：贴壁细胞
- 细胞类型：其他类型
- 种属：人

LS174T人结直肠腺癌细胞（STR鉴定正确）

一、细胞基本属性
细胞名称	LS174T人结直肠腺癌细胞
细胞别称	Ls174T; LS174t; Ls-174-T; LS-174-T; LS 174 T; LS-174T; Ls-174T; LS 174T; LS-174; LS174；人结直肠腺癌细胞
商品货号	ORC0122
种属来源	人
年龄性别	女；58岁
组织来源	直肠；结直肠腺癌
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
背景简介	LS 174T细胞是LS 180细胞的胰蛋白酶化变种。LS 174T细胞比亲本更易传代，像LS 180细胞一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。电镜研究表明，LS 174T细胞有丰富的微丝和细胞质粘液素液泡。LS 174T细胞直肠抗原3阳性；p53抗原表达阴性，但mRNA表达阳性。LS 174T细胞角蛋白染色阳性；LS 174T细胞癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表达呈阳性；癌基因k-ras和sis的表达未做检测。可产生IL-10、IL-6和黏蛋白。
生物安全等级	1
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
基因表达情况	carcinoembryonic antigen (CEA), interleukin 10 (IL-10), interleukin 6 (IL-6), mucin The production of CEA in the ATCC seed stock was 1944 ng per 10^6 cells in 10 days.
保藏机构	ATCC; CL-188 ATCC; CCL-188 BCRC; 60053 DSMZ; ACC-759 ECACC; 87060401；中国典型培养物保藏中心细胞库
培养基	MEM（ATCC改良）+10% FBS+PS
培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
倍增时间	~30-40 hours
STR鉴定位点	Amelogenin：X；CSF1PO：10，14；D13S317：10；D16S539：11，13；D18S51：11，13；D19S433：14，15；D21S11：29，31；D2S1338：18，22；D3S1358：15，17；D5S818：11，15；D7S820：OL，11；D8S1179：12，16；FGA：21，22；TH01：6，7；TPOX：8，9；vWA：15，17；

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL完全培养基，培养过夜）。第三天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min（视细胞消化情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，，用新鲜的完全培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代。

9. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

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